2.1 酶联免疫吸附试验(ELISA)
2.2 间接免疫荧光试验(IFA)
2.3 明胶颗粒凝集试验(PA)
2.4 蛋白印迹试验(WB)
3 结果判定
3.1 ELISA:OD值≥cot off值表示有反应,应复验1次,如重复阳性,可认为HIV抗体阳性。
3.2 IFA:细胞浆和细胞膜呈绿色荧光为阳性。
3.3 PA:
────────────────────────────────────
阳性(+) 1:32 发生颗粒凝集
可疑(+-) <1:32 颗粒凝集不显
阴性(-) 均不发生凝集反应
────────────────────────────────────
3.4 WB:出现P24或gP41带形,同时出现其他带形,为阳性,即可确诊。
三、检疫传染病检验方法
(一)鼠疫耶尔森氏菌检验方法
1 方法
1.1 涂片镜检
1.2 分离培养鉴定
1.3 噬菌体试验
1.4 动物试验
1.5 沉淀反应
1.6 被动血凝试验
1.7 反向血凝试验
1.8 抗体中和试验
1.9 免疫荧光检查
2 结果报告
2.1 初报:2小时内涂片染色报告。
2.2 疑似报告:36小时内报告形态、血清学试验、噬菌体试验结果。
2.3 最终报告:初发鼠疫于72小时内经四步检查结果报告。
(二)霍乱弧菌检验方法
1 方法
1.1 涂片、染色
1.2 动力观察及制动试验
1.3 分离培养
1.4 生化试验
1.5 血清学试验
1.5.1 玻片凝集试验
1.5.2 试管定量凝集试验
1.6 噬菌体试验
2 结果报告
2.1 初报:涂片形态动力观察制动试验2小时内报告。
2.2 疑似报告:增菌培养状况,玻片凝集试验10小时内报告。
2.3 初步鉴定:结合形态、培养性状,18小时内报告。
2.4 确定报告:根据鉴定试验、鉴别试验,48小时内报告。
(三)黄热病病毒检验方法
1 方法
1.1 病毒分离
1.1.1 动物接种
1.1.2 鸡胚接种
1.1.3 组织培养
1.2 血清学试验
1.2.1 抗体中和试验
1.2.2 补体结合试验
1.2.3 血凝及血凝抑制试验
1.3 病理组织切片
2 结果判定
2.1 初步鉴定报告:动物试验,血清学试验呈阳性反应,中和指数>50。双份血清滴度增高4倍以上。
2.2 最终确定报告:分离病毒,传代实验动物的血清学试验及病理组织学切片检查结果。
四、监测传染病检验方法
(一)流感病毒检验方法
1 方法
1.1 病毒分离
1.1.1 鸡胚接种
1.1.2 组织培养
1.2 血清学试验
1.2.1 血凝及血凝抑制试验
1.2.2 红细胞吸附及吸附抑制试验
1.2.3 补体结合试验(CFT)
1.2.4 酶联免疫吸附试验(ELISA)
1.3 免疫荧光抗体快速诊断
2 结果判定
2.1 快速诊断:直接涂片荧光染色,荧光细胞3个以上为阳性,1至2个为可疑,无特异荧光为阴性。
2.2 分离出病毒,用已知标准免疫血清确定甲、乙、丙三型和亚型。
2.3 血清学试验:双份血清抗体滴度比增长4倍为阳性。ELISA双份血清滴度比增长4倍为阳性。ELISA双份血清滴度比值的负对数ED值>0.5为阳性,<0.1为阴性。
(二)疟原虫检验方法
1 方法
1.1 涂片镜检
1.2 血清学试验
1.2.1 琼脂扩散试验